Introducción a los instrumentos y funciones de cultivo celular para el intercambio de tecnología experimental celular
La composición de las células generalmente se divide en cuatro áreas: área de preparación, área de preparación, área de almacenamiento y área estéril.
Las principales funciones del área de preparación son la limpieza, desinfección y preparación; El área de preparación se utiliza principalmente para la preparación de medios de cultivo y reactivos; El área de almacenamiento se utiliza para el banco celular y el almacenamiento de mercancías; El área estéril es el lugar donde el personal del laboratorio se cambia de ropa, amortigua y cultiva. El proceso de cultivo celular se puede dividir en cuatro partes según sus funciones: cultivo celular, almacenamiento, preparación y esterilización.
1, Instrumento de cultivo celular e introducción.
[1. Banco de trabajo súper limpio]
El banco ultra limpio de flujo vertical se utiliza generalmente para el cultivo celular. Bajo presión positiva, no hay fugas de gas. Solo el objeto operativo está protegido, pero el personal y el entorno del laboratorio no están protegidos.
La irradiación ultravioleta realiza la función de esterilización. Esterilización ultravioleta (superficie) + esterilización por ozono (esquina muerta, deflector cerrado). Cada irradiación ultravioleta dura de 20 a 30 minutos, y el aire se sopla durante 10 minutos antes de su uso (preste atención al cambio de aire en la sala de cultivo). La limpieza alcanza la clase 100.
Después de 3000 horas, la potencia de la lámpara ultravioleta se reducirá al 70% del original. Reemplace la tela filtrante gruesa en la parte superior a tiempo y retírela regularmente para limpiarla.
[2. Gabinete de bioseguridad]
Bajo presión negativa, el gas no se escapa, lo que no solo protege la muestra, sino que también se enfoca en proteger al operador y al medio ambiente. Las células de seguridad secundarias transportan virus (como hele / KB), muestras humanas clínicas cultivadas primarias (hongos), experimentos relacionados con lentivirus.
[3. cilindro de CO2]
Los cilindros de CO2 se utilizan principalmente para el almacenamiento de gas CO2. En el proceso de cultivo celular, la mayoría de las células deben realizarse bajo la condición de que el contenido de CO2 sea del 5%. El cilindro de CO2 está conectado principalmente a la incubadora para el mantenimiento estable del contenido de CO2.
[4. microscopio invertido]
El microscopio invertido es un equipo necesario de rutina en el trabajo diario del laboratorio de cultivo celular. Se utiliza principalmente para comprender el crecimiento de las células y observar la aparición de infecciones. Si los fondos lo permiten, se recomienda elegir un microscopio de contraste de fase, un microscopio de anatomía, un microscopio de fluorescencia, un sistema de grabación de video o un dispositivo de filmación de película de lapso de tiempo equipado con un sistema de cámara, que puede disparar y registrar el crecimiento celular en cualquier momento. tiempo.
[5. centrífuga de mesa]
La centrífuga es un instrumento especial que utiliza la fuerza centrífuga para separar y precipitar líquidos mixtos (que contienen sólidos). Se utiliza principalmente para preparar suspensiones celulares, ajustar la densidad celular, lavar y recolectar células. La velocidad de centrifugación en cultivo celular es generalmente de 300xg (alrededor de 1000rpm) durante 5-10 min. Una velocidad de rotación demasiado alta provocará la muerte celular. De acuerdo con las diferentes necesidades, hay centrífugas más funcionales para elegir, como centrífugas de temperatura ajustable de gran capacidad, centrífugas de alta velocidad y centrífugas de congelación de baja temperatura.
[6. incubadora de CO2]
El CO2 es un producto metabólico de las células, un componente esencial del crecimiento celular y también relacionado con el mantenimiento del pH del medio de cultivo. En cultivo celular, el O2 y el CO2 son condiciones necesarias para el crecimiento celular. Las incubadoras de CO2 tienen tipos secos y húmedos, y las condiciones de cultivo generalmente se establecen en 37 ℃ y 5% de CO2. Se evita que el agua en la bandeja de agua de la incubadora de CO2 se contamine con agua estéril + reemplazo regular de 2 semanas + conservante (azida de sodio al 0,02% o sulfato de cobre al 2%).
[7. placa de recuento de células (dispositivo)]
El contador de células es un instrumento de conteo controlado por microcomputadora que integra conteo, estadísticas y visualización. Es confiable y conveniente de usar.
[8. Pipeta]
La función principal de la pipeta es succionar y eliminar líquidos como el medio de cultivo durante el cultivo celular. El rango de medición principal utilizado en el cultivo celular consta de 10 ul / 100 ul / 200 ul / 1000 ul.