1. Banco de trabajo ultra limpio

En la actualidad, la gran mayoría de los laboratorios de células utilizan bancos de trabajo ultralimpios para lograr un funcionamiento aséptico, con un funcionamiento sencillo, una instalación cómoda, un espacio reducido y un buen efecto de purificación. Anhui Renhe Purification presenta dos tipos principales de bancos de trabajo súper limpios: tipo de flujo lateral (tipo vertical) y tipo de salida (tipo de flujo laminar horizontal). El principio de funcionamiento es generalmente que el aire interior es filtrado inicialmente por el filtro grueso, presionado en la caja de presión estática por el ventilador centrífugo y luego filtrado por el filtro de aire de alta eficiencia. El flujo de aire limpio resultante pasa a través del área estéril a una cierta velocidad de viento seccional uniforme, formando así un ambiente de trabajo estéril y libre de polvo con alta limpieza.

(1) Mesa de trabajo de flujo lateral: el flujo de aire después de la purificación del aire fluye desde la izquierda o la derecha hacia el lado opuesto a través de la mesa de trabajo, o de arriba hacia abajo o de abajo hacia arriba, formando una barrera de flujo de aire para mantener estéril el área de trabajo. La estructura de la mesa de trabajo es cerrada;

(2) Mesa de trabajo de salida: el aire purificado fluye hacia el operador, por lo que el flujo de aire exterior no se mezclará con la operación. La estructura de la mesa de trabajo está abierta, pero la operación experimental de sustancias nocivas es desfavorable para el operador. La mesa de trabajo ultra limpia debe ser revisada periódicamente por la limpieza de los departamentos pertinentes. La limpieza de la mesa de trabajo ultra limpia que cumpla con los requisitos debe alcanzar el Grado 100, y el tamaño de las partículas debe probarse con un contador de partículas de polvo ≤ 5 μ El número de partículas de polvo en m no debe exceder los 3,5/L; El flujo de aire se controlará dentro de 0,75-1,0 m3/s; El número promedio de colonias bacterianas es inferior a 1, y el filtro debe reemplazarse si es necesario de acuerdo con la esterilidad.

2. microscopio

El microscopio invertido es un equipo necesario para el trabajo diario del laboratorio de cultivo celular, que se utiliza principalmente para comprender diariamente el crecimiento celular y observar si hay contaminación. Si los fondos lo permiten, se recomienda utilizar un microscopio de contraste de fase de alta calidad, un microscopio anatómico, un microscopio fluorescente, un sistema de grabación de video o un dispositivo de filmación de lapso de tiempo equipado con un sistema fotográfico para tomar fotografías y registrar el crecimiento celular en cualquier momento.

3. Incubadora

Al igual que las células in vivo, las células cultivadas in vitro necesitan sobrevivir a una temperatura constante. En general, la temperatura de crecimiento óptima es de 37 ℃ y la diferencia de temperatura no debe exceder los ± 0,5 ℃. Cuando la temperatura aumenta 2 ℃, se vuelve desfavorable para la supervivencia celular y las células morirán pronto cuando la temperatura supere los 40 ℃. Por lo tanto, la incubadora termostática y la incubadora de CO2 que pueden controlar con precisión la temperatura son la mejor opción.

(1) Incubadora de temperatura constante: se seleccionará una incubadora de control automático de temperatura a prueba de agua o tipo transistor, que tenga alta sensibilidad y control de temperatura estable. La incubadora termostática general es más económica, pero su desventaja es que solo es apta para cultivos cerrados.

(2) Incubadora de CO2: en la actualidad, la mayoría de las salas de cultivo celular se han utilizado ampliamente. La ventaja de la incubadora de CO2 es que puede proporcionar una cierta cantidad de CO2 (la concentración común es del 5%) requerida para el cultivo celular, y es fácil de estabilizar el pH del medio de cultivo, que es adecuado para abierto o semiabierto. cultura. Al usar la botella de cultivo, para mantener el interior de la botella de cultivo ventilado con el mundo exterior, la tapa de la botella se puede aflojar ligeramente. Para evitar la contaminación celular, cuando se utiliza este método de cultivo, el aire de la caja de cultivo debe mantenerse limpio y debe desinfectarse regularmente con radiación ultravioleta o alcohol. Al mismo tiempo, el tanque que contiene agua destilada estéril debe colocarse en la caja de cultivo para evitar la evaporación de la solución de cultivo.

(3) Consumibles de cultivo celular: se pueden usar platos, placas o botellas de cultivo para cultivar células.

4. Horno (horno de secado)

Algunos instrumentos y recipientes utilizados para el cultivo celular deben secarse antes de su uso y la cristalería debe esterilizarse con calor seco. Durante la desinfección por calor seco, la temperatura en el horno generalmente debe alcanzar más de 160 ℃, y generalmente se usa el horno de chorro de aire. Sus ventajas son temperatura uniforme y buen efecto, mientras que sus desventajas son el lento proceso de calentamiento. Al calentar, no se permite calentar antes de soplar, pero el soplado y el calentamiento deben comenzar al mismo tiempo. Cuando la temperatura alcanza los 100 ℃, se debe detener el soplado. Se debe tener cuidado de no quemar el papel o el algodón que envuelve los utensilios. Los desechos quemados pueden afectar el crecimiento de las células. Después de la desinfección, la puerta de la caja no se puede abrir inmediatamente para evitar la rotura de la cristalería debido al enfriamiento repentino.

5. Dispositivo de purificación de agua.

La calidad del agua para el cultivo celular es alta. El agua para preparar el cultivo celular, el líquido relacionado con el cultivo celular y el agua para limpiar los utensilios de cultivo celular deben purificarse estrictamente por adelantado. En la actualidad, hay una variedad de métodos de purificación combinados para hacer que el uso de dispositivos de agua pura que pueden purificar el agua común en agua pura y agua ultrapura sea muy flexible y conveniente. Pueden ser montados en la pared, de escritorio, equipados con tanques de almacenamiento de agua o directamente utilizados con una pistola de separación de líquidos. También se pueden configurar con funciones de esterilización de acuerdo con los requisitos de varios tipos de agua experimental, eliminando de manera efectiva enzimas de ADN, enzimas de ARN, proteasa, etc., así como dispositivos de ultrafiltración de agua pura que pueden eliminar de manera efectiva fuentes de calor y endotoxinas.

6. Refrigerador

El equipo necesario del laboratorio de cultivo celular deberá ser exclusivo y no deberá almacenar sustancias volátiles, inflamables y otras sustancias nocivas para las células, y deberá mantenerse limpio. En general, incluye refrigeradores ordinarios, refrigeradores de baja temperatura y refrigeradores de temperatura ultrabaja.

Refrigerador ordinario: puede almacenar líquido de cultivo, solución salina normal, reactivo líquido de Hanks y otros artículos de cultivo, y puede almacenar muestras de tejido por un corto tiempo.

-Refrigerador de baja temperatura de 20 ℃ y refrigerador de temperatura ultrabaja: se utilizan para almacenar preparaciones que deben congelarse para mantener la actividad biológica y deben almacenarse durante mucho tiempo, como enzimas, suero, etc.

7. Criostato celular

Los contenedores de nitrógeno líquido comúnmente utilizados en el depósito se pueden dividir en diferentes tipos y especificaciones según las necesidades de uso. Se deben considerar tres factores al seleccionar un contenedor de nitrógeno líquido: tamaño del volumen, fácil acceso y uso, y volatilización del nitrógeno líquido. El tamaño del contenedor de nitrógeno líquido es generalmente 25-500L, que puede almacenar alrededor de 250-15000 criotubos de 1 ml. La temperatura más baja del nitrógeno líquido puede alcanzar - 196 ℃, así que preste atención para evitar la congelación cuando lo use. Dado que el nitrógeno líquido es volátil, es necesario observar la cantidad de nitrógeno líquido restante y complementarlo a tiempo para evitar el daño celular o la muerte debido a la insuficiencia de nitrógeno líquido. En la actualidad, hay muchos contenedores de criopreservación de células inteligentes para elegir. Los contenedores de nitrógeno líquido equipados con controladores electrónicos pueden realizar la crioconservación automática; El nivel de nitrógeno líquido y la temperatura de la muestra se pueden monitorear para garantizar que la temperatura de la muestra esté siempre en el punto de temperatura establecido; El sistema de alarma se puede configurar para alarmar en caso de nivel de nitrógeno líquido, temperatura, batería, voltaje, fuente de alimentación y otras anomalías; Al mismo tiempo, se proporciona un sistema de derivación de gas caliente para evitar que el aire caliente a más de -130 ℃ ingrese al tanque de nitrógeno líquido, para proteger la muestra de manera más efectiva y evitar el aumento de temperatura en el contenedor. Además, el tanque de suministro de nitrógeno líquido se puede seleccionar para complementar el nitrógeno líquido al tanque de almacenamiento a través de la tubería de conexión para garantizar la seguridad de la muestra. El nivel de nitrógeno líquido y la temperatura de la muestra se pueden monitorear para garantizar que la temperatura de la muestra esté siempre en el punto de temperatura establecido; El sistema de alarma se puede configurar para alarmar en caso de nivel de nitrógeno líquido, temperatura, batería, voltaje, fuente de alimentación y otras anomalías; Al mismo tiempo, se proporciona un sistema de derivación de gas caliente para evitar que el aire caliente a más de -130 ℃ ingrese al tanque de nitrógeno líquido, para proteger la muestra de manera más efectiva y evitar el aumento de temperatura en el contenedor. Además, el tanque de suministro de nitrógeno líquido se puede seleccionar para complementar el nitrógeno líquido al tanque de almacenamiento a través de la tubería de conexión para garantizar la seguridad de la muestra. El nivel de nitrógeno líquido y la temperatura de la muestra se pueden monitorear para garantizar que la temperatura de la muestra esté siempre en el punto de temperatura establecido; El sistema de alarma se puede configurar para alarmar en caso de nivel de nitrógeno líquido, temperatura, batería, voltaje, fuente de alimentación y otras anomalías; Al mismo tiempo, se proporciona un sistema de derivación de gas caliente para evitar que el aire caliente a más de -130 ℃ ingrese al tanque de nitrógeno líquido, para proteger la muestra de manera más efectiva y evitar el aumento de temperatura en el contenedor. Además, el tanque de suministro de nitrógeno líquido se puede seleccionar para complementar el nitrógeno líquido al tanque de almacenamiento a través de la tubería de conexión para garantizar la seguridad de la muestra. El sistema de alarma se puede configurar para alarmar en caso de nivel de nitrógeno líquido, temperatura, batería, voltaje, fuente de alimentación y otras anomalías; Al mismo tiempo, se proporciona un sistema de derivación de gas caliente para evitar que el aire caliente a más de -130 ℃ ingrese al tanque de nitrógeno líquido, para proteger la muestra de manera más efectiva y evitar el aumento de temperatura en el contenedor. Además, el tanque de suministro de nitrógeno líquido se puede seleccionar para complementar el nitrógeno líquido al tanque de almacenamiento a través de la tubería de conexión para garantizar la seguridad de la muestra. El sistema de alarma se puede configurar para alarmar en caso de nivel de nitrógeno líquido, temperatura, batería, voltaje, fuente de alimentación y otras anomalías; Al mismo tiempo, se proporciona un sistema de derivación de gas caliente para evitar que el aire caliente a más de -130 ℃ ingrese al tanque de nitrógeno líquido, para proteger la muestra de manera más efectiva y evitar el aumento de temperatura en el contenedor. Además, el tanque de suministro de nitrógeno líquido se puede seleccionar para complementar el nitrógeno líquido al tanque de almacenamiento a través de la tubería de conexión para garantizar la seguridad de la muestra.

8. Centrífuga

En el cultivo celular, la centrifugación se usa generalmente para preparar la suspensión celular, ajustar la densidad celular, lavar y recolectar las células. La centrífuga de escritorio de 4000 rpm generalmente está configurada; Para hacer la sedimentación celular, se requiere una fuerza centrífuga de 80-100G, porque una fuerza centrífuga excesiva dañará las células. De acuerdo con los diferentes requisitos, hay centrífugas de temperatura ajustable de gran capacidad, centrífugas de alta velocidad, centrífugas de congelación de baja temperatura y otras centrífugas más funcionales para elegir.

9. Equilibrio

La balanza de precisión y la balanza analítica se utilizan comúnmente. La precisión de la balanza analítica es generalmente de 0,1 mg, 0,01 mg y 0,001 mg. En general, se selecciona una balanza adecuada de acuerdo con el volumen de muestreo y los requisitos de precisión: se debe seleccionar una balanza con una precisión de 0,1 mg cuando el volumen de muestreo es superior a 100 mg; La cantidad de muestreo es de 100-10 mg y se selecciona una balanza con una precisión de 0,01 mg; Se debe seleccionar una balanza con una precisión de 0,001 mg para el volumen de muestreo de 10 mg. La balanza necesita ser calibrada regularmente. La balanza con función de calibración automática se puede seleccionar para facilitar el mantenimiento. Al usar la balanza, preste atención a la limpieza y evite que el polvo y el líquido corrosivos entren en contacto directo con la plataforma de pesaje.