¿Cuál es el tipo de medio de cultivo celular y cómo hacerlo?
El cultivo de células animales consiste en tomar tejidos relevantes del cuerpo del animal, dispersarlos en células individuales (usando tripsina o colagenasa) y luego colocarlos en un medio de cultivo adecuado para permitir que estas células crezcan y proliferen.
¿Cuáles son los tipos de medios de cultivo celular?
De acuerdo con el historial de desarrollo de los medios de cultivo celular, los medios de cultivo celular se pueden dividir aproximadamente en varios tipos, como solución salina balanceada, medios de cultivo celular natural, medios de cultivo celular sintético, medios de cultivo celular sin suero y medios de cultivo celular con contenido limitado. componentes químicos.
1. Medio de cultivo celular DMEM
Dulbecco obtiene DMEM (medio esencial mínimo modificado de Dulbecco) sobre la base del medio MEM. La cantidad de cada componente se duplica y se divide en dos tipos: bajo en azúcar (1000mg/L) y alto en azúcar (4500mg/L). Las células crecen rápido. Es mejor usar glucosa alta para cultivar células tumorales con poca adhesión y clones, y a menudo se usa para cultivar células de mieloma de hibridoma y células transformadas transfectadas con ADN.
2. Medio de cultivo básico neuronal
Puede proporcionar nutrientes básicos para el crecimiento de las neuronas.
3. Medio de insectos Ipl-41
El medio de insectos Ipl-41 está diseñado para la expansión a gran escala de la línea celular de Spodoptera frugiperda y también se usa comúnmente para la expresión de proteínas mediante el sistema de expresión de baculovirus (BEVS). El medio Ipl-41 es una mejora de la fórmula IPL original. Fue desarrollado por Weiss et al. Del laboratorio de patología de insectos del Departamento de agricultura de los Estados Unidos. Se utilizó para la expansión a gran escala de líneas celulares derivadas de Spodoptera meadowensis. Weiss agregó suero bovino fetal y medio TPB al medio básico y logró con éxito el cultivo continuo a gran escala de la línea celular ipl-21 AE (III).
El medio se utiliza principalmente para cultivar y mantener líneas celulares derivadas de lepidópteros y amplificar virus de estas líneas celulares. También se usó medio Ipl-41 para expresar proteína recombinante de baculovirus en células de Spodoptera libres de suero.
1.1 solución salina balanceada (BSS)
BSS se compone principalmente de sales inorgánicas y glucosa. Su función es mantener el equilibrio de la presión osmótica de las células, mantener la estabilidad del pH y proporcionar una nutrición sencilla. Se utiliza principalmente para enjuagar células y preparar otros reactivos.
En la actualidad, el suero utilizado para el cultivo celular es principalmente suero bovino, y algunas células especiales también se cultivan con suero humano y suero de caballo. El suero bovino es adecuado para la mayoría de las células de mamíferos, pero no se descarta que sea más adecuado utilizar otro suero animal cuando se cultivan determinadas células. El suero contiene varias proteínas plasmáticas, polipéptidos, grasas, carbohidratos, factores de crecimiento, hormonas, sustancias inorgánicas, etc. Estas sustancias logran un equilibrio fisiológico al promover el crecimiento celular o inhibir la actividad del crecimiento.
1.2 medio de cultivo celular sintético
El medio de cultivo sintético es un tipo de medio de cultivo que se sintetiza, diseña artificialmente y prepara con sustancias químicas de acuerdo con la composición del medio de cultivo natural. El primer medio básico desarrollado (MEM) es esencialmente una mezcla isotónica de pH tamponado que contiene sal, aminoácidos, vitaminas y otros nutrientes esenciales. Sobre esta base, se han desarrollado continuamente DMEM, IMDM, ham F12, prmi1640 y otros medios de cultivo de células sintéticas.