Condiciones nutricionales del cultivo celular.
Condiciones nutricionales del cultivo celular.
1. Medio de cultivo
El medio de cultivo celular contiene varios nutrientes necesarios para el crecimiento celular, incluidos carbohidratos, aminoácidos, sales inorgánicas, vitaminas, etc. De acuerdo con las necesidades nutricionales de las diferentes células, hay una variedad de medios sintéticos para elegir, como ebss, eagle , MEM, rpmll640, DMEM, etc.
2. Otros ingredientes añadidos
Además de los nutrientes básicos proporcionados por varios medios sintéticos, se deben agregar otros componentes, como suero y factores, de acuerdo con las diferentes células y los diferentes propósitos de cultivo.
El suero proporciona sustancias importantes como la matriz extracelular, el factor de crecimiento y la transferrina, y el suero bovino fetal se usa comúnmente. La proporción de suero agregado debe determinarse de acuerdo con las diferentes células y los diferentes propósitos de la investigación. 10% ~ 20% de suero puede mantener el rápido crecimiento y proliferación de células, lo que se denomina medio de crecimiento; Para mantener el crecimiento lento o la inmortalidad de las células, se puede agregar 2% - 5% de suero, lo que se denomina medio de cultivo de mantenimiento. Sin embargo, también existen sustancias nocivas para el crecimiento y la reproducción celular en el suero, como el complemento, la inmunoglobulina y algunos factores inhibidores del crecimiento; La composición no es clara, lo que afecta el análisis de los resultados; La actividad sérica de diferentes animales y diferentes lotes es diferente, lo que afecta la estabilidad del efecto de cultivo.
La glutamina es una importante fuente de nitrógeno para el crecimiento celular y juega un papel importante en el proceso de crecimiento y metabolismo celular. Sin embargo, la glutamina es muy inestable en solución y fácil de degradar. Puede descomponerse en aproximadamente un 50 % después de 7 días a 4 ℃, por lo que es necesario agregar glutamina antes de usarla.
Para evitar la contaminación, se debe agregar una cierta cantidad de antibióticos al medio de cultivo.